המחלקה לרפואת מעבדה, בית החולים העממי של האזור האוטונומי גואנגשי ג'ואנג, ננינג, סין
המחלקה לרפואת מעבדה, בית החולים המסונף של אוניברסיטת שאנדונג לרפואה סינית מסורתית, ג'ינאן
Huang Huayi, בית הספר לרפואת מעבדה, Youjiang National Medical University, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, New Jersey, 07430, USA.
המחלקה לרפואת מעבדה, בית החולים העממי של האזור האוטונומי גואנגשי ג'ואנג, ננינג, סין
המחלקה לרפואת מעבדה, בית החולים המסונף של אוניברסיטת שאנדונג לרפואה סינית מסורתית, ג'ינאן
Huang Huayi, בית הספר לרפואת מעבדה, Youjiang National Medical University, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, New Jersey, 07430, USA.
השתמש בקישור למטה כדי לשתף את גרסת הטקסט המלאה של מאמר זה עם החברים והקולגות שלך.למד עוד.
על מנת להבין טוב יותר את השינויים הפתולוגיים של COVID-19, זה תורם לניהול הקליני של המחלה ולהכנה לגל של מגיפות דומות בעתיד.
הפרמטרים ההמטולוגיים של 52 חולי COVID-19 שאושפזו בבתי חולים ייעודיים נותחו בדיעבד.הנתונים נותחו באמצעות תוכנת סטטיסטיקה SPSS.
לפני הטיפול, תת-קבוצות של תאי T, סך כל הלימפוציטים, רוחב הפצת תאי דם אדומים (RDW), אאוזינופילים ובזופילים היו נמוכים משמעותית בהשוואה לאחר הטיפול, בעוד שמדדים לדלקת של נויטרופילים, נויטרופילים ולימפוציטים היחס (NLR) ו-C β-reactive protein ( רמות CRP) כמו גם תאי דם אדומים (RBC) והמוגלובין ירדו באופן משמעותי לאחר הטיפול.תת-קבוצות תאי ה-T, סך כל הלימפוציטים והבזופילים של חולים קשים וחולים קריטיים היו נמוכים משמעותית מאלו של חולים בינוניים.הנויטרופילים, NLR, אאוזינופילים, פרוקלציטונין (PCT) ו-CRP גבוהים משמעותית בחולים קשים וחולים אנושיים מאשר בחולים בינוניים.CD3+, CD8+, סך כל הלימפוציטים, טסיות הדם והבזופילים של חולים מעל גיל 50 נמוכים מאלו מתחת לגיל 50, בעוד שהנויטרופילים, NLR, CRP, RDW בחולים מעל גיל 50 גבוהים מאלה מתחת לגיל 50.בחולים קשים וחולים אנושיים, קיים מתאם חיובי בין זמן פרוטרומבין (PT), אלנין aminotransferase (ALT) ו-aspartate aminotransferase (AST).
תת-קבוצות של תאי T, ספירת לימפוציטים, RDW, נויטרופילים, אאוזינופילים, NLR, CRP, PT, ALT ו-AST הם אינדיקטורים חשובים בטיפול, במיוחד עבור חולים קשים וחולים קריטיים עם COVID-19.
מגיפת מחלת הקורונה 2019 (COVID-19) הנגרמת על ידי סוג חדש של נגיף הקורונה פרצה בדצמבר 2019 והתפשטה במהירות ברחבי העולם.1-3 בתחילת ההתפרצות, ההתמקדות הקלינית הייתה בביטויים ובאפידמיולוגיה, בשילוב עם טומוגרפיה ממוחשבת לצילום חולים 4 ו-5, ולאחר מכן אובחנו עם תוצאות חיוביות של הגברה נוקלאוטידים.עם זאת, מאוחר יותר נמצאו פציעות פתולוגיות שונות באיברים שונים.6-9 יותר ויותר עדויות מראות שהשינויים הפתופיזיולוגיים של COVID-19 מסובכים יותר.מתקפת הנגיף גורמת לנזק רב לאיברים ומערכת החיסון מגיבה יתר על המידה.נצפתה עלייה בציטוקינים בסרום ובמכתשית ובחלבוני תגובה דלקתית 7, 10-12, ותת-קבוצות של תאי T לא תקינים נמצאו אצל חולים קשים.13, 14 מדווח כי היחס בין נויטרופילים ללימפוציטים הפך לאינדיקטור שימושי להבחנה בין גושים ממאירים ושפירים של בלוטת התריס בתרגול קליני.15 NLR יכול גם לעזור להבחין בין חולים עם קוליטיס כיבית לבין מטופלים בריאים.16 זה גם ממלא תפקיד בבלוטת התריס וקשור לסוכרת מסוג 2.17, 18 RDW הוא סמן של אריתרוציטוזיס.מחקרים מצאו שזה עוזר להבחין בגושים של בלוטת התריס, לאבחן דלקת מפרקים שגרונית, מחלת דיסק מותני ודלקת בבלוטת התריס.19-21 CRP הוא מנבא אוניברסלי של דלקת ונחקר במקרים רבים.22 לאחרונה התגלה כי NLR, RDW ו-CRP מעורבים גם הם ב-COVID-19 וממלאים תפקיד חשוב באבחון ובפרוגנוזה של המחלה.11, 14, 23-25 לפיכך, תוצאות בדיקות המעבדה חשובות להערכת מצבו של המטופל וקבלת החלטות טיפוליות.ניתחנו בדיעבד את פרמטרי המעבדה של 52 חולי COVID-19 שאושפזו בבתי חולים ייעודיים בדרום סין בהתאם לפני ואחרי הטיפול, חומרתם וגילם, כדי להבין יותר את השינויים הפתולוגיים של המחלה ולסייע בניהול קליני עתידי של COVID-19.
מחקר זה ערך ניתוח רטרוספקטיבי של 52 חולי COVID-19 שאושפזו בבית החולים המיועד Nanning Fourth Hospital מ-24 בינואר 2020 עד 2 במרץ 2020. מתוכם, 45 היו חולים באורח בינוני ו-5 חולים באורח קשה.לדוגמא, הגיל נע בין 3 חודשים לגיל 85.מבחינת מגדר, היו 27 גברים ו-25 נשים.למטופל יש תסמינים כמו חום, שיעול יבש, עייפות, כאבי ראש, קוצר נשימה, גודש באף, נזלת, כאב גרון, כאבי שרירים, שלשולים ומיאלגיה.טומוגרפיה ממוחשבת הראתה שהריאות היו חלקות או זכוכית טחונה, מה שמעיד על דלקת ריאות.אבחן לפי המהדורה השביעית של הנחיות האבחון והטיפול ב-COVID-19 הסיניות.אושר על ידי זיהוי qPCR בזמן אמת של נוקלאוטידים ויראליים.על פי הקריטריונים האבחוניים חולקו החולים לקבוצות בינוניות, קשות וקריטיות.במקרים בינוניים, החולה מפתח חום ותסמונת נשימתית, וממצאי הדמיה מראים דפוסי דלקת ריאות.אם החולה עומד באחד מהקריטריונים הבאים, האבחנה היא חמורה: (א) מצוקה נשימתית (קצב נשימה ≥30 נשימות/דקה);(ב) ריווי חמצן בדם באצבע במנוחה ≤93%;(ג) לחץ חמצן עורקי (PO2) )/שבר השראה O2 (Fi O2) ≤300 מ"מ כספית (1 מ"מ כספית = 0.133 kPa).אם המטופל עומד באחד מהקריטריונים הבאים, האבחנה היא חמורה: (א) אי ספיקת נשימה הדורשת אוורור מכני;(ב) הלם;(ג) אי ספיקת איברים אחרת הדורשת טיפול ביחידה לטיפול נמרץ (ICU).על פי הקריטריונים לעיל, 52 חולים אובחנו כחולים ב-2 מקרים, חולים ב-5 מקרים קשים, וב-45 מקרים חולים בינוני.
כל החולים, לרבות חולים בינוניים, קשים וחולים אנושיים, מטופלים בהתאם להליכים הבסיסיים הבאים: (א) טיפול אדג'ובנטי כללי;(ב) טיפול אנטי-ויראלי: lopinavir/ritonavir ו-α-interferon;(ג) ניתן להתאים את המינון של פורמולת הרפואה הסינית המסורתית בהתאם למצב המטופל.
מחקר זה אושר על ידי ועדת הביקורת של מכון המחקר של בית החולים ננינג הרביעי ושימש לאיסוף מידע על המטופל.
ניתוח המטולוגיה של דם היקפי: ניתוח המטולוגיה שגרתי של דם היקפי מבוצע על מנתח המטולוגיה של Mindray BC-6900 (Mindray) ו-Sysmex XN 9000 המטולוגיה מנתח (Sysmex).דגימת הדם נוגדת הקרישה בצום ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) נאספה בבוקר לאחר אשפוז המטופל בבית החולים.הערכת העקביות בין שני מנתחי הדם לעיל אומתה בהתאם לנוהלי בקרת איכות מעבדה.באנליזה המטולוגית, ספירה והתמיינות של תאי דם לבנים (WBC), תאי דם אדומים (RBC) ואינדקס מתקבלים יחד עם מגרשי פיזור והיסטוגרמות.
ציטומטריית זרימה של תת-אוכלוסיות לימפוציטים מסוג T: ציטומטר זרימה FACSCalibur BD (Becton, Dickinson and Company) שימש לניתוח ציטומטריית זרימה לניתוח תת-אוכלוסיות של תאי T.נתח את הנתונים על ידי תוכנת MultiSET.המדידה בוצעה בהתאם לנוהלי ההפעלה הסטנדרטיים ולהוראות היצרן.השתמש בצינור איסוף דם נוגד קרישה EDTA כדי לאסוף 2 מ"ל של דם ורידי.ערבבו בעדינות את הדגימה על ידי סיבוב צינור הדגימה מספר פעמים כדי למנוע עיבוי.לאחר איסוף הדגימה, היא נשלחת למעבדה ומנתחת תוך 6 שעות בטמפרטורת החדר.
ניתוח אימונופלואורסצנטי: חלבון תגובתי C (CRP) ופרוקלציטונין (PCT) נותחו מיד לאחר השלמת האנליזה באמצעות דגימות דם שנותחו על ידי המטולוגיה, ונותחו על מנתח חימונופלואורסצנטי FS-112 (Wondfo Biotech Co., LTD.) הניתוח.) פעל לפי הוראות היצרן ותקני נוהלי מעבדה.
נתח סרום אלנין אמינוטרנספראז (ALT) ואספרטט אמינוטרנספראז (AST) על מנתח כימי HITACHI LABOSPECT008AS (HITACHI).זמן הפרותרומבין (PT) נותח על מנתח STAGO STA-R Evolution (Diagnostica Stago).
תגובת שרשרת פולימראז כמותית (RT-qPCR): השתמש בתבניות RNA מבודדות ממשטחי אף-לוע או הפרשות של דרכי הנשימה התחתונות כדי לבצע RT-qPCR כדי לזהות SARS-CoV-2.חומצות גרעין הופרדו בפלטפורמת ההפרדה האוטומטית של חומצות גרעין SSNP-2000A (Bioperfectus Technologies).ערכת האיתור סופקה על ידי Sun Yat-sen University Daan Gene Co., Ltd. ושנגחאי BioGerm Medical Biotechnology Co., Ltd. המחזור התרמי בוצע על מחזור תרמי ABI 7500 (Applied Biosystems).תוצאות בדיקת נוקלאוזיד נגיפי מוגדרות כחיוביות או שליליות.
תוכנת SPSS גרסה 18.0 שימשה לניתוח נתונים;מבחן t-מדגם זוגי, מבחן t-מדגם עצמאי או מבחן Mann-Whitney U הופעל, וערך P <.05 נחשב משמעותי.
חמישה חולים קשים ושני חולים קשים היו מבוגרים יותר מאלה שבקבוצה הבינונית (69.3 לעומת 40.4).המידע המפורט של 5 חולים אנושיים ו-2 חולים אנושיים מוצג בטבלאות 1A ו-B. חולים קשים וחולים אנושיים הם בדרך כלל נמוכים בתת-קבוצות של תאי T ובספירת לימפוציטים הכוללת, אך ספירת תאי הדם הלבנים נורמלית בערך, למעט חולים. עם תאי דם לבנים מוגברים (11.5 × 109/L).גם נויטרופילים ומונוציטים הם בדרך כלל גבוהים.ערכי ה-PCT, ALT, AST ו-PT בסרום של 2 חולים במחלה קשה ומטופל אחד במחלה קשה היו גבוהים, וה-PT, ALT, AST של חולה קריטי אחד ו-2 חולים קריטי היו בקורלציה חיובית.כמעט לכל 7 החולים היו רמות CRP גבוהות.אאוזינופילים (EOS) ובזופילים (BASO) נוטים להיות נמוכים בחולים קשים וחולים קשים (טבלה 1A ו-B).טבלה 1 מפרטת את התיאור של הטווח התקין של פרמטרים המטולוגיים באוכלוסיה הבוגרת הסינית.
ניתוח סטטיסטי הראה שלפני הטיפול, תאי CD3+, CD4+, CD8+ T, סך כל הלימפוציטים, רוחב הפצת RBC (RDW), אאוזינופילים ובזופילים היו נמוכים משמעותית מאשר לאחר הטיפול (P = .000,. 000, .000, .012, . 04, .000 ו-.001).האינדיקטורים הדלקתיים נויטרופילים, יחס נויטרופילים/לימפוציטים (NLR) ו-CRP לפני הטיפול היו גבוהים משמעותית מאשר לאחר הטיפול (P = .004, .011 ו-.017, בהתאמה).Hb ו-RBC ירדו באופן משמעותי לאחר הטיפול (P = .032, .026).PLT עלה לאחר הטיפול, אך הוא לא היה מובהק (P = .183) (טבלה 2).
תת-קבוצות תאי ה-T (CD3+, CD4+, CD8+), סך כל הלימפוציטים והבזופילים של חולים קשים וחולים אנושיים היו נמוכים משמעותית מאלו של חולים בינוניים (P = 0.025, 0.048, 0.027, 0.006 ו-0.046).רמות נויטרופילים, NLR, PCT ו-CRP בחולים קשים וחולים אנושיים היו גבוהות משמעותית מאלו של חולים בינוניים (P = .005, .002, .049 ו-.002, בהתאמה).לחולים קשים וחולים קשה היה PLT נמוך יותר מאשר חולים בינוניים;עם זאת, ההבדל לא היה מובהק סטטיסטית (טבלה 3).
CD3+, CD8+, סך כל הלימפוציטים, טסיות הדם והבזופילים של חולים מעל גיל 50 היו נמוכים משמעותית מאלו של חולים מתחת לגיל 50 (P = .049, 0.018, 0.019, 0.010 ו-.039, בהתאמה), בעוד שאלו מעל גיל 50. בני 50 של מטופלים הנויטרופילים, יחס NLR, רמות CRP ו-RDW היו גבוהים משמעותית מאלו של מטופלים מתחת לגיל 50 (P = .0191, 0.015, 0.009 ו-.010, בהתאמה) (טבלה 4).
COVID-19 נגרם מהידבקות בנגיף הקורונה SARS-CoV-2, שהופיע לראשונה בווהאן, סין בדצמבר 2019. התפרצות ה-SARS-CoV-2 התפשטה במהירות לאחר מכן והובילה למגיפה עולמית.1-3 בשל ידע מוגבל על האפידמיולוגיה והפתולוגיה של הנגיף, שיעור התמותה בתחילת ההתפרצות גבוה.למרות שאין תרופות אנטי-ויראליות, ניהול המעקב והטיפול ב-COVID-19 השתפרו מאוד.זה נכון במיוחד בסין כאשר טיפולים משלבים משולבים עם רפואה סינית מסורתית לטיפול במקרים מוקדמים ומתונים.26 חולי COVID-19 נהנו מהבנה טובה יותר של השינויים הפתולוגיים והפרמטרים המעבדתיים של המחלה.מַחֲלָה.מאז, שיעור התמותה ירד.בדוח זה, לא היו מקרי מוות בין 52 המקרים שנותחו, כולל 7 חולים קשים וחולים אנושיים (טבלה 1A ו-B).
תצפיות קליניות מצאו שלרוב החולים עם COVID-19 יש מספר מופחת של לימפוציטים ותת אוכלוסיות של תאי T, הקשורים לחומרת המחלה.13, 27 בדוח זה, נמצא כי תאי CD3+, CD4+, CD8+ T, סך כל הלימפוציטים, RDW לפני הטיפול, אאוזינופילים ובזופילים היו נמוכים משמעותית מאשר לאחר הטיפול (P = .000, .000, .000, .012, .04, .000 ו-.001).התוצאות שלנו דומות לדיווחים הקודמים.לדיווחים אלו יש משמעות קלינית בניטור חומרת ה-COVID-19.8, 13, 23-25, 27, בעוד שלמדדים הדלקתיים נויטרופילים, יחס נויטרופילים/לימפוציטים (NLR) ו-CRP לאחר טיפול מקדים מאשר טיפול (P = .004, . 011 ו-.017, בהתאמה), אשר הבחינו ודווחו בעבר בחולי COVID-19.לכן, פרמטרים אלו נחשבים לאינדיקטורים שימושיים לטיפול ב-COVID-19.8.לאחר הטיפול, 11 המוגלובין ותאי דם אדומים הופחתו באופן משמעותי (P=0.032, 0.026), מה שמעיד על כך שלמטופל היה אנמיה במהלך הטיפול.עלייה ב-PLT נצפתה לאחר הטיפול, אך היא לא הייתה מובהקת (P = .183) (טבלה 2).הירידה במספר הלימפוציטים ובתת אוכלוסיות תאי T קשורה לדלדול תאים ולאפופטוזיס כאשר הם מצטברים באתרים דלקתיים הנלחמים בנגיף.לחלופין, ייתכן שהם נצרכו על ידי הפרשת יתר של ציטוקינים וחלבונים דלקתיים.8, 14, 27-30 אם תת-קבוצות הלימפוציטים ותאי ה-T נמוכות באופן מתמשך והיחס CD4+/CD8+ גבוה, הפרוגנוזה גרועה.29 בתצפית שלנו, לימפוציטים ותת-קבוצות של תאי T התאוששו לאחר הטיפול, וכל 52 המקרים נרפאו (טבלה 1).רמות גבוהות של נויטרופילים, NLR ו-CRP נצפו לפני הטיפול, ולאחר מכן ירדו באופן משמעותי לאחר הטיפול (P = .004, .011 ו-.017, בהתאמה) (טבלה 2).התפקוד של תת-קבוצות של תאי T בזיהום ובתגובה חיסונית דווח בעבר.29, 31-34
מכיוון שמספר החולים הקשים והחולים באורח קשה מדי קטן, לא ביצענו ניתוח סטטיסטי על הפרמטרים שבין חולים קשים וחולים אנושיים לבין חולים בינוניים.תת-קבוצות תאי ה-T (CD3+, CD4+, CD8+) והלימפוציטים הכוללים של חולים קשים וחולים אנושיים נמוכים משמעותית מאלו של חולים בינוניים.הרמות של נויטרופילים, NLR, PCT ו-CRP בחולים קשים וחולים קשים היו גבוהות משמעותית מאלו של חולים בינוניים (P = .005, .002, .049 ו-.002, בהתאמה) (טבלה 3).שינויים בפרמטרים של מעבדה קשורים לחומרת COVID-19.35.36 הסיבה לבזופיליה אינה ברורה;ייתכן שהדבר נובע מצריכת מזון בזמן המלחמה בנגיף במקום הזיהום בדומה ללימפוציטים.35 המחקר מצא שלחולים עם COVID-19 חמור היו גם אאוזינופילים מופחתים;14 עם זאת, הנתונים שלנו לא הראו כי תופעה זו עשויה לנבוע ממספר קטן של מקרים חמורים וקריטיים שנצפו במחקר.
מעניין לציין כי בחולים קשים וחולים אנושיים, קיים מתאם חיובי בין ערכי PT, ALT ו-AST, המעיד על כך שנגרם נזק רב לאיברים בהתקף הנגיף, כפי שהוזכר בתצפיות אחרות.37 לכן, הם עשויים להיות פרמטרים שימושיים חדשים להערכת התגובה והפרוגנוזה של טיפול ב-COVID-19.
ניתוח נוסף הראה שהמספר CD3+, CD8+, סך כל הלימפוציטים, טסיות הדם והבזופילים של חולים מעל גיל 50 היו נמוכים משמעותית מאלו של חולים מתחת לגיל 50 (P = P = .049, .018, .019, .010 ו-. 039, בהתאמה), בעוד שרמות נויטרופילים, NLR, CRP ו-RBC RDW בחולים מעל גיל 50 היו גבוהות משמעותית מאלו של חולים מתחת לגיל 50 (P = 0.0191, 0.015, 0.009 ו-0.010 , בהתאמה) (טבלה 4) .תוצאות אלו דומות לדיווחים קודמים.14, 28, 29, 38-41 ירידה בתת-אוכלוסיות של תאי T ויחס גבוה של תאי CD4+/CD8+ T קשורים לחומרת המחלה;מקרים של קשישים נוטים להיות חמורים יותר;לכן, יותר לימפוציטים ייצרכו בתגובה החיסונית או ייפגעו באופן רציני.כמו כן, RBC RDW גבוה יותר מצביע על כך שחולים אלה פיתחו אנמיה.
תוצאות המחקר שלנו מאשרות עוד כי לפרמטרים המטולוגיים יש משמעות רבה להבנה טובה יותר של השינויים הקליקופתולוגיים של חולי COVID-19 ולשיפור ההנחיה של הטיפול והפרוגנוזה.
Liang Juanying ונונג Shaoyun אספו נתונים ומידע קליני;Jiang Liejun וצ'י Xiaowei ביצעו ניתוח נתונים;Dewu Bi, Jun Cao, Lida Mo ו- Xiaolu Luo ביצעו ניתוח שגרתי;הואנג הואאי היה אחראי על ההתעברות והכתיבה.
אנא בדוק את האימייל שלך לקבלת הוראות לאיפוס הסיסמה שלך.אם לא תקבל אימייל תוך 10 דקות, ייתכן שכתובת הדוא"ל שלך לא רשומה וייתכן שתצטרך ליצור חשבון Wiley Online Library חדש.
אם הכתובת תואמת לחשבון קיים, תקבלו מייל עם הנחיות לאחזור שם המשתמש
זמן פרסום: 22 ביולי 2021